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高中教學(xué)儀器繼續(xù)分享一一waters

時間:2022-08-28 13:44:52 點擊次數(shù):1024
 

1.目的:建立本公司化驗室用Waters e2695高效液相使用與維護的標(biāo)準(zhǔn)操作程序,規(guī)范Waters高效液相的正確使用和校準(zhǔn),保證測量結(jié)果正確無誤。

2.范圍:適用于本公司化驗室Waters e2695高效液相的操作與維護。

3.術(shù)語:

4.職責(zé):

化驗室QC人員負(fù)責(zé)本規(guī)程的執(zhí)行;

質(zhì)保部長負(fù)責(zé)本規(guī)程執(zhí)行情況的監(jiān)督。

5.操作程序與方法:

5.1 儀器組成及電源:

5.1.1 儀器組成:本儀器由泵、進樣器、紫外檢測器、柱溫箱和Empower色譜工作站組成。

5.1.2 電源:泵為220V穩(wěn)壓電源,檢測器為220V穩(wěn)壓電源,工作站為220V穩(wěn)壓電源。

5.2 外部硬件的操作:

5.2.1依次打開電腦、液相分離單元和檢測器電源,液相分離單元進行開機自檢(注:打開順序錯誤可導(dǎo)致軟件與儀器連接不上)。同時檢查流動相和10%甲醇的體積是否充足。

5.2.2開機自檢后,"分離單元"將進入Idle(空閑)模式。

5.2.3沖洗密封墊,主屏幕下按【Diag】→"Diagnosities"界面,按Prime Seal Wash顯示"Prime Seal Wash"屏幕,按【Start】,待排放口有水流出(氣泡排凈)時(約1分鐘),按【Halt】停止,按【Close】關(guān)閉界面。(注:10%甲醇足夠多)5.2.4沖洗進樣針,按Prime Ndl Wash 顯示"Prime Ndl Wash"屏幕,按【Start】,待自動停止。清洗兩次,按【Close】關(guān)閉界面。(注:可配制與實驗用流動相相同溶液)

5.2.5濕法灌注:按【Exit】退出"Diagnosities"界面,按【Menu/Status】,進入"Status(1)"屏幕,在"Compomtion"中對所灌注的管路輸入100%,按【Direct Function】,光標(biāo)選"Wet Prime",按【Enter】,顯示"Wet Prime"后按【OK】,待結(jié)束后,依次重復(fù)操作對所用管路(A/B/C/D)進行灌注。

5.2.6沖洗自動進樣器,在"Status(1)"屏幕下,按【Direct Function】,光標(biāo)選"Purge Injector",按【Enter】,顯示"Purge Injector"界面,按【OK】。

5.3點開Empower Pro軟件圖標(biāo),進入操作界面。

5.3.1 單擊鼠標(biāo)左鍵進入"配置系統(tǒng)"。選中"項目"后,單擊 "新建項目"。 出現(xiàn)"新建項目向?qū)?,"表空間"中接受50MB的表空間缺省設(shè)置。在該向?qū)Р襟E中,系統(tǒng)默認(rèn)設(shè)置了"支持全面審計追蹤"。如果不需要,可取消"支持完全審計追蹤"復(fù)選框,以取消對項目元素(如方法和樣品)所做的所有修改的記錄。如需要,則選中該復(fù)選框之后,還再選擇是否需要對"方法變化"、"結(jié)果變化"、"樣品信息變化"和"刪除"的更改進行注釋。單擊"下一步"。"選項"頁中,選擇用于本項目的選項。單擊"下一步"。"訪問控制"頁中,根據(jù)需要選擇設(shè)置對您所創(chuàng)建的項目具有訪問權(quán)限的用戶和用戶組或者接受缺省的選項,然后單擊"下一步"。 在"復(fù)制"中,接受默認(rèn)的選項,然后單擊"下一步"。在"輸入名稱"頁中,輸入項目的名稱,必要時輸入注釋內(nèi)容。最后單擊"完成"來結(jié)束新項目的創(chuàng)建。 項目列表中出現(xiàn)新建的項目名稱。

5.3.2 分析方法的建立:單擊命令欄上的View Method,如果出現(xiàn)"New Processing Parameters"頁,選擇 LC,然后單擊 OK。單擊命令欄上的 Instrument Parameters。 儀器參數(shù)出現(xiàn)在"View Method"工作區(qū)中,在此頁面下,點擊"Pump"設(shè)置:A泵流速、B泵流速、總流速以及柱溫,柱壓上限一般設(shè)在3500,下限一般設(shè)在70。再點擊"UV Detector"設(shè)置:波長、單雙波長。 從"File"菜單中選擇 Save As。"Save current method"對話框?qū)⒊霈F(xiàn),在"Name"文本框中輸入"方法名稱",在"Comments"文本框中輸入有關(guān)該方法的注釋(可選),然后單擊Save。

5.3.3 平衡系統(tǒng):單擊采集欄上的 (Equilibrate)。采集欄上"Status Information"部分將顯示系統(tǒng)平衡的狀態(tài)。從下拉列表中選擇"自己方法名稱",然后單擊 Equilibrate。為系統(tǒng)留出大約30分鐘以上時間進行平衡,或直到基線穩(wěn)定。

5.4測定操作:

5.4.1 單針進樣,可以單擊左下角的圖標(biāo),出現(xiàn)以下"單針進樣參數(shù)"對話框:在Method 下拉菜單中,可以選擇指定的儀器參數(shù),在所有參數(shù)設(shè)定完畢后,即可單擊"Inject"鍵開始進樣。同樣可以通過圖標(biāo)終止進樣。

5.4.2 樣品組進樣,a.在"方法組"下拉菜單中選擇欲使用的方法組,同時在下方的"儀器方法"下拉菜單中,選擇欲使用的儀器方法。。b. 在sample set 表單中,逐行填寫"Sample Name"、"Function"以及"Method"與"Run Time"、"Inj of Vail"" # of Injs"后,即可點擊圖標(biāo)。c. 一旦點擊圖標(biāo)后,會出現(xiàn)如下"Run Sample Set"對話框:在對話框中寫入樣品組的名稱,然后點擊"Run",即可運行樣品組。d. 如果運行中需要終止樣品組的運行,可點擊圖標(biāo),終止運行。

5.5 數(shù)據(jù)的處理

5.5.1 利用向?qū)Ы⑻幚韰?shù)

a.在Find Data中的選中要處理的樣品,單擊(Review,查看)圖標(biāo),打開數(shù)據(jù)。

b. 單擊(處理方法向?qū)В琍rocessing Method Wizard),出現(xiàn)對話框。

c. 選擇"Start New Processing Parameters" (建立新的處理參數(shù))。然后單擊"OK"。

d. 如果出現(xiàn)下面的對話框,選擇"LC",然后單擊OK。

e. 在"Integration-Integration Region"頁面中,在空格中輸入,或者在圖上用鼠標(biāo)左鍵拖拽來選擇積分的起止時間,然后單擊"Next"。

f. 出現(xiàn)"Peak Width and Threshold"頁面,接受默認(rèn)的數(shù)值,不作改動,單擊"Next"。

g. 在"Peak Rejection"頁中,根據(jù)需要設(shè)定最小面積和/或者最小峰高(也可不設(shè)),然后單擊"Next"。

h. 在"Calibration-General"頁中,選擇定量的方式:Area,校正曲線的擬合方式:Linear(線性)。然后單擊"Next"。

i. 在"Name" 欄中編輯組分名稱(注意,此處的名稱必須與在前面"Alter Sample"中所輸入的名稱一致)。然后單擊"Next"。

j. 在此頁面中,不作任何改動,單擊"Next"。

k. 在此頁面中,選擇校正的類型(type of Calibration),如為外標(biāo)法,選"External Standard Calibration",單一內(nèi)標(biāo)法(即較為常用的內(nèi)標(biāo)法)選擇"Single Internal Standard",并在下拉菜單中選擇內(nèi)標(biāo)峰,然后單擊"Next"。

j. 出現(xiàn)"Method Name"頁,輸入方法名稱,必要時輸入注釋(Comments)。單擊"Finish"完成向?qū)А?/p>

k. 單擊 (Save all)保存全部。

5.5.2 定量計算

a. 回到"Find Data"的Channel選項卡。

用鼠標(biāo)選擇標(biāo)樣以及未知樣品(注意一定要先選擇標(biāo)樣,再選擇未知樣),然后單擊右

鍵出現(xiàn)快捷菜單,選擇Process。出現(xiàn)如下窗口:在Peocess中,選"Use specified method"(使用指定的方法),并在下拉菜單中選擇剛才利用向?qū)Ы⒌姆椒ā螕?OK"。

b.到"Results"(結(jié)果)選項卡中,單擊"Updata"鍵更新結(jié)果。

c. 選中欲瀏覽的結(jié)果,單擊(Review,查看),出現(xiàn)查看主窗口,在色譜圖下方的"Peak"表中,"Amount"欄中,即可看到定量的結(jié)果。

d. 單擊工作欄中的(Calibration Curve,校正曲線),打開校正曲線窗口。

窗口的上部為曲線的方程等內(nèi)容。可通過下拉菜單查看不同組分的相關(guān)信息。

5.5.3數(shù)據(jù)的打印

1. 在"Results"選項卡中選擇欲打印的結(jié)果,單擊(預(yù)覽出版)。出現(xiàn)"打開報告方法"對話框。可以選擇選擇"Use a Report Method that was generated to appropriate for the selected data(使用對選中的數(shù)據(jù)適用的報告方法)",或者在"Use the following Report Method(使用以下的報告方法)"下拉菜單中選擇適當(dāng)?shù)膱蟾娣椒?例如LC Calibration Report,LC校正曲線

報告),然后單擊"OK"。

2. 預(yù)覽無誤后,可單擊,進行打印。

5.6關(guān)機操作:

5.6.1全部測定完畢后,按規(guī)定用適當(dāng)溶劑沖洗泵、進樣閥、色譜柱和檢測器。

5.6.2關(guān)閉檢測器、泵及其他部件電源并拔下各插頭,做好使用登記。

5.7維護與保養(yǎng):

5.7.1試驗所用的流動相應(yīng)經(jīng)過0.45μm的膜過濾,以降低色譜柱受污染的程度,延長使用壽命。

5.7.2試驗前先打開電源穩(wěn)壓器,待電壓穩(wěn)定后,方可打開儀器開關(guān)。

5.7.3色譜柱最高工作壓力一般不能超過3500。

5.7.4檢測器的光源具有一定的使用時間,所以每次在進樣品前半小時左右打開,試驗結(jié)束后,應(yīng)先關(guān)閉檢測器電源。

5.7.5最后一次進樣完成后,應(yīng)用流動相沖洗一段時間,以保證洗脫完全,然后用純水沖洗約半小時,以除去流動相中的無機鹽類。

5.7.6最后用甲醇對色譜柱進行再生保存。

5.7.7操作者應(yīng)細(xì)心了解儀器各部件性能。

5.7.8每次操作完畢后,應(yīng)及時清理所用物件,倒掉廢瓶中的廢液,用柔軟的抹布擦拭儀器表面,保持儀器的清潔。

5.7.9若儀器長時間不用,可定期加電,使儀器預(yù)熱一段時間,以免儀器內(nèi)部件受潮。

5.7.10為保證檢驗數(shù)據(jù)的可靠,每年應(yīng)由計量部門負(fù)責(zé)校驗一次。

5.8數(shù)據(jù)安全與備份管理

5.8.1 實驗員使用前,首先必須分別授權(quán)軟件的使用賬號和密碼,并且確保防止泄露。不同實驗員對應(yīng)不同賬號,不得共享。

5.8.2 未經(jīng)質(zhì)保部經(jīng)理允許,任何人不得私自修改儀器參數(shù)、方法參數(shù)。

5.8.3 每3個月對各賬號的實驗數(shù)據(jù)進行一次備份,存檔至其他受控的計算機中。

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